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蛋白質純化 -八聯(lián)管離心機的新技術
是當代生物產業(yè)當中的核心技術。該技術難度、成本均高;例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質分離純化當中。常用技術有:
?。?、沉淀,
?。?、電泳:蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。
?。场⑼肝觯豪猛肝龃汛蠓肿拥鞍踪|與小分子化合物分開的方法。
?。?、層析:
a.離子交換層析,利用蛋白質的兩性游離性質,在某一特定PH時,各蛋白質的電荷量及性質不同,故可以通過離子交換層析得以分離。如陰離子交換層析,含負電量小的蛋白質首先被洗脫下來。
b.分子篩,又稱凝膠過濾。小分子蛋白質進入孔內,滯留時間長,大分子蛋白質不能時入孔內而徑直流出。
?。?、超速離心:既可以用來分離純化蛋白質也可以用作測定蛋白質的分子量。不同蛋白質其密度與形態(tài)各不相同而分開。